李凤
,
康经武
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12018
发展了一种新型的磁性纳米粒子应用于人血清中特异性糖蛋白的亲和富集。制备的磁性纳米粒子具有核/壳/壳结构，即由 Fe3 O4磁性粒子/硅胶层/有机聚合物外层构成。伴刀豆凝集素 A（Con A）以共价键合的形式通过短链聚乙二醇固定在粒子表面，实现了人血清中特异性糖蛋白的高效富集。富集的蛋白经过胰蛋白酶酶解后，所得的肽段经离线的二维色谱分离，用高分辨质谱共鉴定出80种蛋白。通过 NetNGlyc 等搜索软件分析确定其中76种为糖蛋白，分析发现在血清中质量浓度仅为0.00001 g / L 的β-2-glycoprotein 1也得到了鉴定，表明我们发展的磁性纳米粒子与凝集素相结合的方式，可以高效地富集复杂体系中与主要蛋白成分含量相差12个数量级的低丰度糖蛋白。
关键词:
液相色谱
,
质谱
,
富集
,
糖蛋白
,
凝集素
,
磁性纳米粒子
